該類培養(yǎng)基廣泛應用于疫苗生產和各種初代病毒宿主細胞的細胞培養(yǎng)及單一細胞培養(yǎng);如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等細胞系的培養(yǎng)。
Cellworld DMEM培養(yǎng)基的配制方法:
1 制備新鮮三蒸水或Millipore超純水。
2 稱取所需量的干粉培養(yǎng)基,加入約終體積一半的三蒸水中;若配制一個包裝的培養(yǎng)液,在將整個包裝的干粉倒入三蒸水后,需用水洗包裝袋內面2次,倒入培養(yǎng)液中,以保證所有干粉都溶解成培養(yǎng)液。磁力攪拌或人工攪拌使之溶解。
3 根據(jù)包裝袋上的要求補加所需量的碳酸氫鈉;根據(jù)實驗需要,添HEPES(5-20mmol/L)、谷氨酰胺和其他特殊物質。
4 加水定容到終體積。
5 必要時用1 mol/L 鹽酸和1 mol/L 氫氧化鈉調節(jié)pH。
6 用無菌0.22um濾膜過濾除菌,分裝于無菌血清瓶中,4℃冰箱保存。
配制好的培養(yǎng)液用前加入100U/mL青霉素和100U/mL鏈霉素,并根據(jù)需要加入血清(5%-20%)。
Cellworld DMEM培養(yǎng)基的特點:
(1)氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;
(2)維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍;
(3)含有糖酵解途徑中的重要物質——丙酮酸;
(4)含有微量的鐵離子。
DMEM培養(yǎng)基應用廣泛?;贒MEM培養(yǎng)基中氨基酸、微生物含量豐富,并具有糖酵解中的丙酮酸和微量Fe離子,因此在細胞培養(yǎng)、疫苗生產等方面的應用最為常見。
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